1 产品基本信息
产品名称(中文):Super Redex™ Gel 核酸染料 (10,000×in Water)
产品名称(英文):Super Redex™ Gel (10,000×in Water)
产品编号:MF1830
2 规格或纯度
0.1 mL(40T),0.5 mL(200T)
3 产品介绍
产品简介:
Super Redex™ Gel(10,000×in Water)是用于核酸凝胶电泳的高灵敏、无致突变性安全型荧光染料。主要适用于紫外成像系统,亦兼容蓝光凝胶成像系统,灵敏度是溴化乙锭(EB)的 10-100 倍,可检测低至 100 pg 的 DNA 样本。
产品特点:
l高稳定:可室温保存,耐受 100℃高温煮沸。
l高灵敏:灵敏度为溴化乙锭的 10-100 倍,最低可检测 100 pg DNA 样本。
l高安全:通过环境动物测试实验和 Ames 突变性双重验证,无致突变性且对环境无害。
适用范围:
核酸凝胶电泳
4 储存与运输
储存条件:室温保存
运输条件:常温运输
5 使用方法(仅供参考)
Super Redex™ Gel的使用方式与 EB 完全一致,可选择 “前染法” 或 “后染法”,前者更方便,后者灵敏度更高;因该染料本身已具备高灵敏性,常规情况推荐前染法,特殊情况(如核酸样品量极少)可选用后染法。
前染法:
(1) 按照标准方案制备琼脂糖凝胶溶液,或根据需求配制适当浓度(如 1%~3%)的琼脂糖胶液。
(2) 琼脂糖完全融解后,适当冷却(避免凝固),按每 50 mL 胶液加入 5 μL Super Redex™ Gel(10,000︰1 终浓度)的比例加入染料,混匀后将琼脂糖胶液倒入制胶模具。
(3) 按标准操作进行电泳凝胶实验,适量 DNA 或 RNA 在胶中电泳后,用 300 nm/254 nm 紫外线透照器成像,在紫外灯下可观察到明亮的核酸条带。
后染法:
(1) 制备 3× 工作液:将 Super Redex™ Gel 10,000× 储液用 0.1 M NaCl 水溶液稀释约 3,300 倍(例:配制 100 mL 3× 工作液,需 30 μL 10,000× 储液 + 100 mL 0.1 M NaCl 溶液)。
(2) 根据标准方案运行凝胶电泳,电泳结束后对琼脂糖凝胶进行染色。
(3) 将电泳后的琼脂糖凝胶放入适当容器(如聚丙烯容器,避免使用玻璃容器,因其会吸附染料),加入足量 3× 工作液,确保覆盖胶面。
(4) 在摇床上以 30-50 rpm 缓慢摇动染色 20-60 分钟(染色时间根据胶厚度调整,胶厚则时间延长);若需缩短时间,可在放置摇床前将染色液预加热至50-60℃。
(5) 染色完毕后无需洗涤,直接在紫外灯下观察核酸条带;若需更清晰条带,可用水漂洗 1-2 次,每次 3-5 分钟以消除背景。
(6) 染色液可重复使用 3 次左右,可一次大量制备,室温避光保存直至用完。
(7) 若为聚丙烯酰胺凝胶,可直接在预先经硅烷化溶液处理的玻璃平皿上染色,将工作液均匀覆盖胶板,染色 30 分钟。
注:
1)电泳时间建议不超过 2 小时;
2)常规酒精沉淀核酸过程中,Super Redex™ Gel 可从双链核酸上全部去除;
3)若染色效果不佳,可从多方面排查:上样量、电泳条件(电泳液是否新鲜)、染料与胶是否混匀、染料是否析出等。
6 注意事项
l本产品在蓝光下成像效果不如紫外,因此推荐使用紫外凝胶成像系统。
l推荐使用 TAE 电泳缓冲液并及时更换,保持电泳缓冲液新鲜。
l染料无需低温冷藏,请于室温下储存,室温下储藏过久可能会出现干管现象,可直接加入蒸馏水并加热 45-50 ℃ 进行震动充分溶解后即可。若放置低温包括 4℃,若发现沉淀,请将染料加热至 45-50 ℃,振荡溶解,亦不影响使用效果。
l本产品仅限于科研用途并且不得存放于普通住宅内。
l为了您的安全和健康,请遵循您所在常规实验室安全规定。
我们建议使用我们的 DNA 凝胶提取试剂盒从 DNA 样本中去除本款染料,但一些客户报告说,通过苯酚-氯仿提取成功去除了本款染料。客户还反馈说,使用 Zymo Research 的 ZymoClean TM 凝胶 DNA 回收试剂盒、Sigma 的 GenElute TM 琼脂糖旋转柱、Life Technologies 的 PureLink ® 快速凝胶提取试剂盒、GE Healthcare 的 illustra GFX PCR DNA 和凝胶带纯化试剂盒、罗氏应用 科学公司的高纯 PCR 产品纯化试剂盒和 Thermo Scientific 的 GenJET 凝胶提取试剂箱,效果良好。
我们不建议将Super Redex™ Gel在熔融琼脂糖中储存超过几天。但是未使用的含有本款染料的凝固琼脂糖可以重新熔化。如果未使用的含染料琼脂糖要储存一天左右,我们建议将其避光保存。
对。一些用户反馈称,在本染料存在的情况下对 DNA 进行 PCR,无需纯化步骤,例如通过在 TE 缓冲液中孵育本款产品染色的凝胶切片,通过被动扩散提取 DNA 用于 PCR,或使用几微升来自含有 DNA 的本款产品染色凝胶切片的熔融琼脂糖用于 PCR。
可以。使用聚丙烯酰胺凝胶时,推荐采用后染法;对于含有 3.5%-10% 丙烯酰氨的聚丙烯酰胺凝胶,典型染色时间为 30 分钟至 1 小时,丙烯酰胺含量较高的凝胶需延长染色时间。
该染料属于大分子、高亲和力染料(旨在提升安全性),可能影响预制胶中 DNA 的迁移,可通过以下方法解决:
l减少 DNA 上样量,推荐为原上样量的三分之一左右。
l使用较低含量琼脂糖的凝胶,尤其对较高分子量的 DNA,可提升分离效果。
l条带增多:因该产品灵敏度极高,若 DNA 样本不纯,低灵敏度染料(如 EB)无法检测的杂质条带会被显现,需优化样本纯度。
l条带亮度减弱:大概率是染料从溶液中沉淀析出,可将产品溶液加热至 45-55℃,持续 3-5 分钟,然后涡旋溶解即可。
l背景高:主要原因是琼脂糖质量不佳,建议更换高质量琼脂糖。
此款核酸染料可与 dsDNA、ssDNA 和 RNA 结合,但敏感性存在差异,对 dsDNA 的敏感性优于 ssDNA 和 RNA;同时 RNA 本身易分解,电泳过程中可能发生降解,进一步影响染色效果。
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