正在进行18 h的细胞成像实验。在12 h后将Draq5培养基更换为不含Draq5的培养基时，染色强度会下降。1）是否需要始终将Draq5保存在培养基中，即使可能会有毒性影响？2）如果从培养基中去除Draq5，染色会持续多长时间？

1）我们预计细胞染色在培养基更换后会减少。尽管Draq5对dsDNA具有高亲和力，但仍存在平衡，去除培养基中的低残留浓度会破坏这种平衡。

2）我们认为染色在去除后可能会持续1-2 h，但这可能取决于细胞暴露于的先前使用的浓度。因为如果有任何毒性证据，人们会希望保持较低的浓度（可能是0.5-1 μM）。可以肯定的是，Draq5是否会产生毒性影响完全取决于细胞系和状态。根据文献报道可以合理地预测，未处于增殖状态的细胞对任何细胞通透性DNA嵌入探针的敏感性较低。例如，它可能更有可能适用于巨噬细胞或人脐静脉内皮细胞等终末分化细胞类型，其中它和密切相关的CyTRAK Orange已在长期实验中得到证明。如果使用的细胞系在使用时没有毒性表现，那么我们可以在Draq5存在的条件下持续进行18 h的实验。