为什么出现了一些非特异标记？

1)有些细胞，比如平滑肌核酸酶或聚合酶活性水平较高，使得DNA全部被切断，易导致假阳性。建议：取出细胞后要立即固定并充分固定，以阻止这些酶的活性，同时设置阴性对照。

2)固定液浓度过高或过低，导致中心部分细胞固定效果不佳，而使得中心部细胞自溶、DNA链出现不规则断裂，产生假阳性。建议：推荐使用4%多聚甲醛。

3)TdT酶反应时间过长或Tunel反应过程中反应液发生蒸发或渗漏，细胞表面不能保持湿润。注意控制反应时间，并确保TdT酶反应液能很好地覆盖样品。

4)有些试剂或细胞存在自发荧光，选择染料时要避开自发荧光的颜色。