为什么没有染上荧光？

1)固定不充分。固定液首选4%多聚甲醛，现用现配。不建议使用乙醇，乙醇固定液的渗透力较弱，影响TUNEL标记效率。

2)细胞膜和核膜的通透不充分，TdT酶未能到达核内。细胞可用0.2% Triton X-100溶液通透5-30min，不同的细胞所需要的通透时间略有不同，适当调整。

3)延长标记时间至2h，并适当增加TdT酶及dUTP的用量。

4)确定实验对象细胞有凋亡。准备一份DNase I处理的阳性对照，验证TdT酶反应是否正确进行。