为什么荧光背景高？

1)支原体污染：可以使用支原体染色检测试剂盒验证。

2)TdT酶反应时间过长，可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液将TdT酶稀释2-5倍后再按照说明书操作，稀释后的TdT酶仅供当日使用。

3)处于高速分裂和增殖状态中的细胞，有时也会出现细胞核中的DNA断裂。建议：在非高增殖期取样检测；

4)有些试剂或细胞存在自发荧光，选择染料时要避开自发荧光的颜色。

5)DAB孵育时间过长，减少DAB染色时间。

6)Biotin-X-dUTP的非特异性结合，在TdT酶反应之后，再用含0.1% Triton X-100和1 mg/ml BSA的PBS洗三次。