技术问答

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  用Draq5对小鼠细胞进行2-3 h 的活细胞成像。在对Draq5染色的细胞成像多久之后，在细胞毒性产生并使细胞死亡之前可以停止成像？

  使用说明中有相应描述“Draq5染色在37C下加速，孵育时间（5-30 min）可能会 缩短”，但这应该通过滴定和每种细胞类型进行分别测定。在未添加任何激动剂/

  2025-12-03

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  Draq5储液是否含DMSO？

  该品为水溶液形式，不含DMSO。

  2025-12-03

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  我想做一个大约4小时的细胞迁移研究，需要使用染料对细胞进行荧光标记。有什么建议吗？

  Cell Tracker CM-DiI 因带有温和的巯基反应氯甲基取代基，该取代基通过与含巯基 的肽和蛋白质共价结合，从而提供更好的保留时间，但因为不同细胞，

  2025-12-03

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  我想用DAPI或者 Hoechst 等细胞核染料做细胞追踪实验，建议这样做吗？

  不建议，当这些核染料结合 DNA或RNA后会影响核酸的正常功能，破坏转录和复制，而 Cell Tracker CM-DiI 染料则可以正常追踪细胞而不破坏他们的

  2025-12-03

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  实验中一个细胞迁移研究大约 4 h，需要用染料荧光标记细胞，是否有相关染料推荐？

  Calcein AM 和 FDA（荧光素二乙酸盐）是用于该应用的一些染料的实例，由于这些染料不与任何细胞组分结合或共价连接，它们可能具有短的保留时间，因为一些细

  2025-11-14

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  当我用 Calcein AM 对细胞进行染色时，细胞经过固定处理后信号就消失了，为什么？

  Calcein AM 扩散到细胞中，“AM”部分由细胞酯酶裂解，随后染料分子的荧光信号可以在细胞质中被观测到，但不结合细胞组分。这意味着它们能够为“整个细胞”染

  2025-11-14

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  是否有染料，将其在活细胞中加入，在高浓度下可以自淬灭，但如果细胞死亡，染料将被释放并取消淬灭？

  有的，这通常是通过 Calcein AM 或 FDA（荧光素二乙酸酯）完成的，这些染料在被酯酶分解之前不会发出荧光，经酯酶修饰后，在非常高的浓度下会自我淬灭，一

  2025-11-14

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  用 Calcein AM 标记了细胞，但是第二天成像时，没有来自 Calcein AM 的荧光，为什么？

  Calcein AM 是细胞追踪和普通细胞质染色的良好选择，然而，它不与任何东西结合，可能会在几个小时内被主动抽出细胞，Calcein AM 在活细胞内的保留取

  2025-11-14

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  细胞追踪有很多产品，该如何选择？

  首先确定追踪细胞的时间，然后考虑染料结合机制。（1）钙黄绿素染料（MX1477）标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳，但也会被某些类型细胞迅速外排。（2）亲脂性

  2025-11-14

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  Di 系列染料染色细胞后，用 4% 多聚甲醛固定和 0.1% TritonX-100 透化后，染色亮度低的原因是什么？

  Di 系列细胞膜染料均为亲脂类染料，经 TritonX-100 透化处理后，磷脂双分子层会被破坏，进而影响染料与细胞膜的结合，导致染色亮度降低；Di 系列染料较

  2025-11-05

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  细胞膜染料溶解度多少合适？是否有推荐？

  不同细胞膜染料溶解度不同，需参考对应说明书，以下为常用细胞膜染料溶解度参考：(1) DiO（货号MX1445）：在 DMSO 中溶解度为 5 mg/mL（需超声

  2025-11-05

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  动物对重复注射 D - 萤光素的反应如何？

  (1) 急性反应：a. 局部组织反应：注射部位可能出现轻微炎症反应，一般不影响整体健康；b. 整体生理反应：间隔时间短可能导致前次注射的 D - 萤光素未完全代

  2025-11-04

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  为什么 D -萤光素钾盐/钠盐要溶于无Ca2+和Mg2+的 PBS？

  (1) 保护萤光素酶结构与活性：萤光素酶活性部位对环境敏感，Ca2+和Mg2+可能与其结构域或氨基酸残基相互作用，影响空间构象；(2) 防止竞争性抑制：生物发光

  2025-11-04

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  如何正确储存 D -萤光素钾盐？

  一般建议储存在-20℃环境中，低温可有效减缓化学活性，降低分解或变质速度；若没有-20℃冰箱，也可储存在 2~8℃冷藏环境中，在一定程度上延缓质量变化。

  2025-11-04

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  使用 D -萤光素钾盐有哪些安全注意事项？

  需在通风良好的实验室环境下操作；操作人员要佩戴合适的防护装备（如手套、护目镜），以防直接接触；需妥善保管，规避受潮、受热或光照等影响稳定性的因素；并依据相关规定

  2025-11-04

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  在活体动物成像中如何使用 D - 萤光素钾盐？

  首先，将表达萤光素酶的细胞或组织植入活体动物体内；之后以合适方式（如注射）将 D -萤光素钾盐引入动物体内；过一定时间后，用特定成像设备（如 Revvity 小

  2025-11-04

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  D -萤光素钾盐主要应用在哪些方面？

  主要应用于生物医学研究领域。例如在活体动物成像中，通过标记细胞或生物分子，利用其生物发光特性可追踪细胞活动、监测疾病发展；在基因表达研究中，可作为报告基因的底物

  2025-11-04

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  适用于哪些细胞？

  SuperView™ Caspase-3 底物已被报道用于多种原代细胞和科研文献中的永生化细胞中。

  2025-11-04

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  特异性如何？

  与其它 caspase-3 底物相似，CaspTrace™488 底物基于能被 Caspase-7 切割的 DEVD caspase-3 共同序列，其它半胱天冬

  2025-11-04

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  可用于随后的免疫染色吗？

  可以。推荐使用 2~4% 的多聚甲醛室温固定 10~15 min，固定时间过长会导致信号下降。

  2025-11-04