1 产品基本信息

产品名称（中文）：NO 检测试剂盒

产品名称（英文）：Nitric Oxide Assay Kits

产品编号：MX1531

产品规格：200 T,1000 T

产品组分

2 产品介绍

Griess试剂可用于光度法检测亚硝酸盐。试剂含有两种化学物质，磺胺酸和N-（1-萘基）乙二胺。在酸性条件下，磺胺酸被亚硝酸盐转化成重氮盐，可与N-（1-萘基）乙二胺形成高度着色的偶氮染料，可以在548 nm检测此染料，由于NO极其不稳定，被氧化生成亚硝酸盐和硝酸盐，Griess通过检测亚硝酸盐的含量，间接反映出NO的含量。检测原理见图 1。

图1 检测原理图

产品特点：

l方便快捷：可快速定量 NO 含量。

适用范围：

NO检测

3 储存与运输

储存条件：-20 ℃ 避光保存

运输条件：冰袋运输

4 使用方法（仅供参考）

一、自备材料

1. 耗材

96孔板细胞培养板

2. 试剂

标准品稀释溶剂

二、操作步骤

1. 取出Griess Reagent I和II，使其恢复室温。

2. 标准品稀释

用待测样品所用溶液稀释标准品NaNO₂（1~100 μM）。可将标准品稀释成1 μM、10 μM、20 μM、40 μM、80 μM、100 μM，每孔加入100 μL标准品。若样品浓度太低，可适当降低标准曲线的范围（1 μM、2 μM、3 μM、4 μM、6 μM、8 μM、10 mM）。

3. 样品检测

(1)按200 μL/孔的总体积，在96孔板中加入100 μL/孔的样品；如果样品为培养液上清，可直接取样，如有沉淀物则需离心后取上清。如样品为细胞或组织，可快速冻融裂解，再离心取上清，体积不足100 μL可以用diH₂O或0.9% NaCl稀释（相应的标准品也需用diH₂O或0.9% NaCl稀释）。

(2)50 μL/孔，在各孔中加入Griess Reagent I。

(3)50 μL/孔，在各孔中加入Griess Reagent II。

(4)540 nm 处测定吸光度。如无540 nm滤光片，520~560 nm 的滤光片也可。如无酶标仪或合适的滤光片，也可以通过目测比色，确定样品中一氧化氮的浓度。目测比色时标准品需要更为精细的浓度梯度。

5 注意事项

l在使用Griess试剂之前，将其恢复至室温，并检查溶液是否有沉淀。如果Griess Reagent I取出时含有沉淀，可将其置于37 ℃水浴锅中，水浴直至沉淀溶解。

l荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

l本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

l 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。