1 产品基本信息

产品名称（中文）：DiR 细胞膜荧光探针

产品名称（英文）：DiR Cell Membrane Probe

产品编号：MX1444

2 规格或纯度

5 mg

3 产品介绍

产品简介

DiR 是亲脂性、近红外荧光长链碳花青染料，常用于标记细胞质膜，其两个 18 - 碳链可插入细胞膜实现特定且稳定的细胞染色，几乎无细胞间染料转移。在室温下用 0.1% TritonX-100 透化的固定透化处理后，可使用 DiR 进行质膜染色；也能在 DiR 染色后用多聚甲醛（不可用甲醇等其他试剂）固定，但不建议染色后透化。此外，DiR（近红外荧光）可与 DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）等其他细胞膜荧光染料配合，为多色成像和流式细胞分析提供有效工具。以每次使用 100 μL 浓度为 5 μM 的染色工作液计算，5 mg DiR 配置成工作液约可使用 9867 次。

产品特点

l稳定性好：荧光亮度强且抗淬灭性好，能在细胞内良好保留；

l批间差小：批间差控制效果佳；

l扩散速度快：常用于细胞示踪、细胞迁移等实验；

l使用方便：可搭配公司其他试剂使用，灵活便捷。

适用范围

细胞膜染色、细胞融合、粘附和迁移示踪剂、小动物成像

产品参数：

l外观：可溶于乙醇、DMF或DMSO的深蓝绿色固体

lEx/Em：748/780 nm（MeOH）

lCAS号：100068-60-8

l分子式：C₆₃H₁₀₁IN₂

l分子量：1013.4

l分子结构图：

l光谱图：

4 储存与运输

储存条件：-20℃避光保存

运输条件：冰袋运输

5 使用方法（仅供参考）

l染色液制备

(1) 配制储液：用无水 DMSO 或无水 EtOH 配制，浓度为 1~5 mM；未使用的储液分装后在- 20℃储存，避免反复冻融。

(2) 工作液制备：用无血清培养基、HBSS 或 PBS 等合适缓冲液稀释储液，配制浓度为 1~5 μM 的工作液；

注：工作液最终浓度需根据不同细胞系和实验体系优化，可从推荐浓度的 10 倍范围内开始摸索最优浓度。

l悬浮细胞染色

(1) 加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使细胞密度达到 1×10⁶ /mL；

(2) 37℃孵育细胞 2~20 min（不同细胞最佳孵育时间不同，可先以 20 min 为起始孵育时间，后续优化体系以获得均一标记效果）；

(3) 孵育结束后，以 1000~1500 rpm 转速离心 5 min，倾倒上清液，再缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞；

(4) 重复上述离心重悬步骤两次以上。

l贴壁细胞染色

(1) 将贴壁细胞培养在无菌盖玻片上；

(2) 从培养基中取出盖玻片，吸走过量培养液，保持细胞表面湿润；

(3) 在盖玻片一角加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞；

(4) 37℃孵育细胞 2~20 min（不同细胞最佳孵育时间不同，可先以 20 min 为起始孵育时间，后续优化体系以获得均一标记效果）；

(5) 吸干染料工作液，用预温的培养液清洗盖玻片 2~3 次，每次用预温培养基覆盖所有细胞并孵育 5~10 min，之后吸干培养基，保持细胞表面湿润。

l结果检测

(1) 样品可在培养基中检测，通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。

注：需用红色光激发，荧光显微镜可选择 Cy7 滤光片，流式细胞仪选择 Cy7（RL3）通道。

6 注意事项

l使用前请将产品瞬时离心至管底，再开展后续实验；

l荧光染料均存在淬灭问题，实验操作时请尽量避光，以减缓荧光淬灭；

l用 DiR 染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在 PBS 中的 4% 多聚甲醛进行固定，使用其他不适当的固定液会导致荧光背景较高；

l本产品仅限于科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内；

l为保障您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；