1 产品基本信息

产品名称（中文）：DiI 细胞膜荧光探针

产品名称（英文）：DiI Cell Membrane Probe

产品编号：MX1448

2 规格或纯度

10 mg

3 产品介绍

产品简介

DiI 是常用的细胞膜荧光探针之一，呈橙红色荧光，属于亲脂性膜染料。进入细胞膜后可侧向扩散，逐渐染色整个细胞的细胞膜；在进入细胞膜前荧光极弱，进入细胞膜后可被激发出强荧光。

DiI 可作为示踪剂或长期示踪剂（Long-Term Tracer），广泛用于正向或逆向、活的或固定的神经等细胞或组织，且通常不影响细胞生存力。被 DiI 标记的神经细胞在体外培养可存活长达 4 周，在体内可存活长达 1 年；其在固定神经元细胞膜上的迁移速率为 0.2~0.6 mm/day，在活神经元细胞膜上的迁移速率为 6 mm/day。

除细胞膜荧光标记外，DiI 还可用于检测细胞融合与粘附、发育或移植过程中细胞的迁移，通过 FRAP（光脱色荧光恢复技术）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性及标记脂蛋白等。

在固定透化（室温下用 0.1% TritonX-100 透化）后，可用 DiI 进行质膜染色；也可在 DiI 染色后用多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）固定，但不建议染色后透化。DiI 常与 DiA 配合用于细胞膜双色标记。

以每次使用 100 μL 染色工作液（浓度 10 μM）计算，10 mg DiI 配置为工作液约可使用 10707 次。

产品特点

l稳定性好：荧光亮度强且抗淬灭性好，可在细胞内良好保留；

l批间差小：产品为公司自研，批间差控制效果佳；

l使用方便：可搭配公司其他试剂使用，灵活便捷。

适用范围

l细胞膜荧光染料

l神经元顺行和逆行示踪

l细胞长期示踪

产品参数：

l外观：可溶于乙醇、DMF、DMSO的深红色固体

lEx/Em：549/565 nm（MeOH）

lCAS号：41085-99-8

l分子式：C₅₉H₉₇ClN₂O₄

l分子量：933.9

l分子结构图:

l光谱图：

4 储存与运输

储存条件：-20℃避光保存

运输条件：冰袋运输

5 使用方法（仅供参考）

l染色液制备

(1) 配制储液：用无水 DMSO 或 EtOH 配制，浓度为 1~10 mM；未使用的储存液需分装后于 - 20℃储存，避免反复冻融。

(2) 工作液制备：用合适的缓冲液（如无血清培养基、HBSS 或 PBS）稀释储液，配制浓度为 1~10 μM 的工作液；

注：工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系优化，可从推荐浓度的 10 倍范围内开始摸索最优浓度。

l悬浮细胞染色

(1) 加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使细胞密度为 1×10⁶ /mL；

(2) 37℃孵育细胞 5~20 min（不同细胞最佳孵育时间不同，可先以 20 min 为起始孵育时间，后续优化体系以获得均一标记效果）；

(3) 孵育结束后，1000~1500 rpm 离心 5 min，倾倒上清液，再缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞；

(4) 重复上述离心重悬步骤两次以上。

l贴壁细胞染色

(1) 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上；

(2) 从培养基中取出盖玻片，吸走过量培养液，保持细胞表面湿润；

(3) 在盖玻片一角加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞；

(4) 37℃孵育细胞 5~20 min（不同细胞最佳孵育时间不同，可先以 20 min 为起始孵育时间，后续优化体系以获得均一标记效果）；

(5) 吸干染料工作液，用预温的培养液清洗盖玻片 2~3 次，每次用预温培养基覆盖所有细胞并孵育 5~10 min，之后吸干培养基，保持细胞表面湿润。

(6) 结果检测样品可在培养基中检测，通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析；

注：需用黄色光激发，荧光显微镜可选择 Cy3 滤光片，流式细胞仪选择 YL1 通道。

6 注意事项

l使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验操作；

l荧光染料均存在淬灭问题，实验操作时请尽量避光，以减缓荧光淬灭速度；

lDiI 染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在 PBS 中的 4% 多聚甲醛进行固定，使用其他不适当的固定液会导致荧光背景较高；

l本产品仅限于科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内；

l为保障您的安全和健康，操作时请穿实验服并佩戴一次性手套；