1 产品基本信息

产品名称（中文）：5(6)-羧基二乙酸荧光素

产品名称（英文）：5(6)-CFDA

产品编号：MX1473

2 规格或纯度

50 mg

3 产品介绍

产品简介：

5-(6)-CFDA 是活细胞荧光示踪探针，具有细胞膜通透性，可加载到细胞中进行孵育。一旦进入细胞，非荧光性的 CFDA 由胞内酯酶水解成羧基荧光素并产生荧光，荧光产物仅积聚在具有完整细胞膜的细胞中，死细胞因无完整细胞膜无法被染色；CFDA 标记可通过荧光显微镜或流式细胞仪检测细胞。

产品特点：

l稳定性强：荧光亮度强且抗淬灭性好

l批间差小：产品为公司自研，批间差控制良好

l使用方便：可搭配公司其它试剂使用，方便灵活

适用范围：

活细胞荧光示踪探针、胞质定位

产品参数：

l外观：可溶于DMSO的灰白色固体

lCAS号：124387-19-5

lEx/Em：492/517 nm（pH=9水解后）

l分子式：C₂₅H₁₆O₉

l分子量：460.4

l分子结构图：

4 储存与运输

储存条件：-20℃避光保存

运输条件：冰袋运输

5 使用方法（仅供参考）

5.1 工作液准备

(1) 10 mM 5 (6)-CFDA 储液准备：用 0.21 mL 的 DMSO 溶解 1 mg 的 5 (6)-CFDA，即可得到 10 mM 的储液；将储液保存至 - 20℃或 - 80℃冰箱中避光保存，注意请勿冻存。

(2) 5 (6)-CFDA 工作液准备（现配现用）：用无血清的细胞培养基或 PBS 稀释储液（上述步骤所得），推荐使用浓度范围 1~10 μM。

注：不同细胞所需染色工作液浓度可能不同，请根据实际情况优化条件。

5.2 细胞染色

(1) 细胞准备

a. 悬浮细胞：将细胞悬浮液置于 4℃离心机，1000 g 离心 3~5 min，弃上清；用 1×PBS 清洗细胞两次，每次 5 min。

b. 贴壁细胞：去除培养基，用 1×PBS 清洗细胞，胰蛋白酶消化细胞成单细胞悬液；将细胞悬浮液置于 4℃离心机，1000 g 离心 3-5 min，弃上清；用 1×PBS 清洗细胞两次，每次 5 min。

(2) 加入 1 mL 5 (6)-CFDA 工作液，室温孵育 30 min。

(3) 4℃离心机，400 g 离心 3~4 min，去上清。

(4) 用 1×PBS 清洗细胞两次，每次 5 min。

(5) 用无血清培养液或者 PBS 重悬，并用荧光显微镜或者流式细胞仪进行检测。

注：荧光显微镜可使用 FITC 滤光片，流式细胞仪可使用 FITC 通道进行观察或检测。

6 注意事项

l荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

l本品溶解后尽快使用，请勿冻存，可以进行分装储存于 - 20℃或 - 80℃。

l本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内。

l为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。