1 产品基本信息
产品名称(中文):6-羧基二乙酸荧光素
产品名称(英文):6-CFDA
产品编号:MX1475
2 规格或纯度
20 mg
3 产品介绍
产品简介:
6-CFDA 是活细胞荧光示踪探针,具有细胞膜通透性,可以加载到细胞进行孵育。6-CFDA 一旦进入细胞,非荧光性的 6-CFDA 由胞内酯酶水解成 6 - 羧基荧光素(CF),产生荧光,这些荧光产物只能积聚在具有完整细胞膜的细胞中,因此,死细胞无完整细胞膜不能被染色。6-CFDA 标记可以通过荧光显微镜或者流式细胞仪来检测细胞。
产品特点:
l稳定性强:荧光亮度强且抗淬灭性好
l批间差小:批间差控制的好
l使用方便:可搭配我司其它试剂使用,方便灵活
适用范围:
活细胞荧光示踪探针
4 储存与运输
储存条件:-20℃避光保存
运输条件:冰袋运输
5 使用方法(仅供参考)
l工作液准备
(1) 10 mM 6-CFDA 储液准备:0.217 mL 的 DMSO 溶解 1 mg 的 6-CFDA 即可得到 10 mM 的储液。请将储液保存至 - 20℃或 - 80℃冰箱中避光保存,同时注意请勿冻存。
(2) 6-CFDA 工作液准备(现配现用):用无血清的细胞培养基或 PBS 稀释储液(步骤 1 所得),推荐使用浓度范围 1~10 μM。
注:对于工作液浓度的选择,不同的细胞可能需要的染色工作液浓度不同,请根据实际情况进行优化条件。
l细胞染色
(1) 细胞准备
a. 悬浮细胞:细胞悬浮液于 4℃离心机,1000 g 离心细胞 3~5 min,弃上清。1×PBS 清洗细胞两次,每次 5 min。
b. 贴壁细胞:去除培养基,1×PBS 清洗细胞,胰蛋白酶消化细胞成单细胞悬液。细胞悬浮液于 4℃离心机,1000 g 离心细胞 3~5 min,弃上清。1×PBS 清洗细胞两次,每次 5 min。
(2) 加入 1 mL 6-CFDA 工作液,室温孵育 30 min。
(3) 4℃离心机,400 g 离心 3~4 min,去上清。
(4) 1×PBS 清洗细胞两次,每次 5 min。
(5) 用无血清培养液或者 PBS 重悬,并用荧光显微镜或者流式细胞仪进行检测。
注:荧光显微镜可以用 FITC 滤光片,流式细胞仪可以用 FITC 通道进行观察或检测。
6 注意事项
l荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
l本品溶解后尽快使用,请勿冻存,可以进行分装储存于 - 20℃或 - 80℃。
l本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。
l为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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