1 产品基本信息

产品名称（中文）：DiOC2(3) 膜电位荧光探针

产品名称（英文）：DiOC2(3) Membrane Potential Probe

产品编号：MX1465

2 规格或纯度

20 mg

3 产品介绍

产品简介

DiOC2 (3)（3,3′- 二乙氧基羰花青碘化物）是一种应用广泛的膜电位探针，常被用于线粒体膜电位的研究。DiOC2 (3) 能够穿透真核细胞的细胞质，在浓度低于 100 nM 时，染料在具有活跃膜电位的线粒体中积累，形成红色荧光聚集体；当使用破坏线粒体膜电位的物质（如 CCCP）处理细胞时，DiOC2 (3) 染色强度降低。

DiOC2 (3) 染色的细胞可通过流式细胞仪的蓝色激发、绿色和红色发射可视化，该试剂可与其他试剂搭配使用（例如红色激发的 Annexin V–APC），用于活力和凋亡的研究。

产品特点：

l性能稳定：荧光亮度高且抗淬灭性好

l批间差小：产品为公司自研，批间差控制的好

l使用方便：提供多种膜电位染料，选择灵活方便

适用范围：

膜电位染色

产品参数：

l外观：可溶于DMSO、DMF橘红色固体

lEx/Em：482/497 nm（MeOH）

lCAS 号：905-96-4

l分子式：C₂₁H₂₁IN₂O₂

l分子量：460.3

l分子结构图:

4 储存与运输

储存条件：-20℃避光保存

运输条件：冰袋运输

5 使用方法（仅供参考）

lDiOC2 (3) 标记细胞

由于细胞类型、培养条件的差异以及应用方向的不同，建议起始浓度 50 nM 摸索最佳染色条件。

将 DiOC2 (3) 溶于无水 DMSO 配制成 100 mM 的储液：向管中加入 435 μL 的无水 DMSO，充分溶解。每次实验前，需将储液充分涡旋混匀。开始实验前，将 DiOC2 (3) 和 CCCP 恢复至室温。

(1) 用预热的培养基、磷酸盐缓冲液或其他缓冲液重悬细胞，使细胞最终密度为 1×10⁶个 /mL。

(2) 设置对照，向管中加入 1 μL CCCP 溶液至终浓度为 50 μM，37℃孵育 5 min。

注：CCCP 可以和 DiOC2 (3) 同时添加。为了获得不同细胞类型的最佳效果，可能需要滴定 CCCP。

l配置合适浓度的 DiOC2 (3) 工作液，加入工作液至终浓度为 50 nM，37℃孵育 15~30 min。如用 Annexin V 结合物标记，请按下方Annexin V 结合物额外标记执行；如果不需要其他染色，请继续执行以下步骤。

(3) （可选）清洗细胞一次，向每个细胞管中加入适量预热的 PBS 缓冲液。

(4) 1000 rpm 离心 5 min。向每个管中加入 500 μL PBS 缓冲液，轻弹管壁使其重悬。

(5) 使用FT^TM488染料的发射滤光片在488 nm激发下进行流式分析，用CCCP处理的样品调节补偿。

lAnnexin V 结合物额外标记

可通过额外的标记方法检测 DiOC2 (3) 染色后细胞的凋亡及生存状态，如用 Annexin V-APC 标记：

(1) 向DiOC2 (3) 标记的细胞中加入适量预热的 PBS 缓冲液洗涤细胞一次。

(2) 1000 rpm 离心 5 min，然后重悬于 100 μL 1×Annexin 结合缓冲液中。

(3) 加入 5 μL Annexin V 结合物（如 Annexin V-APC）。

(4) 37℃孵育 15 min。

(5) 加入 400 μL Annexin 结合缓冲液。

(6) 用适合于 FT^TM488/PI 和 FT^TM633 染料的发射滤光片，在 488 nm 和 633 nm 激发下进行流式分析。

6 注意事项

l使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验；

l荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭；

l本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内；

l为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。