1 产品基本信息

产品名称（中文）：磺酸基-Cy3-乙基-dUTP

产品名称（英文）：Sulfo-Cy3-E-dUTP

产品编号：MS1157

产品规格：25 nmole

2 产品介绍

Sulfo-Cy3-E-dUTP 由我司自主合成，为 FISH 探针的制备以及细胞凋亡检测试剂盒提供荧光染料。

产品特点：

l稳定性强：产品性能稳定，标记效果好；

l批间差小：批间差控制的好。

适用范围：

    FISH 探针、TUNEL 检测

3 产品参数

外观颜色：深红色粉末

Ex/Em = 551/561 nm

分子式：C₄₃H₅₂KN₅Na₃O₂₁P₃S₂

分子量：1240.0

消光系数 ：162,000

分子结构图：                       光谱图：

4 储存与运输

储存条件：-20 ℃ 避光保存

运输条件：冰袋运输

5 使用方法（仅供参考）

一、储液制备

采用 pH7.4 的 10 mM Tris 溶解后，分装保存，避免反复冻融。

二、DNA 标记

（一）试剂（自备）

1. Taq DNA 聚合酶

2. 10×Taq reaction buffer

3. 25 mM MgCl₂

4. dATP, dTTP, dCTP, dGTP（单独溶液）1 mM each

5. DNA 模板

6. 正向、反向引物 ，10 μM each

7. PCR 清洁试剂盒

（二）PCR 反应

1. 先按照表 1 反应体系配制 PCR 反应混合液。

2. 再在每个反应管加 1 μL 1mM FT™ dye dUTP 染料。

注 ：阴性对照管，加 1 μL 1mM dTTP 代替 FT™ dye dUTP。

3. 按照表 2 程序运行 PCR 反应。

注 ：(1)热变性时间依据不同的 Taq 酶进行调整。

(2)退火温度设置：Tm -5℃。

(3)延伸时间根据扩增片段大小而定 ，一般 200~300 bp 片段设为 1 min 即可。

4. 可选步骤。用 PCR 清洁试剂盒去除未掺入的单核苷酸。

表 1 PCR 反应体系同系列产品

表2 PCR反应条件

(1)取 10%的 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳（凝胶不加入 DNA 染料），检测 PCR 反应的效率和特异性，通过紫外凝胶成像仪或激光凝胶扫描仪观察。其中远红外染料（波长≥650 nm），肉眼无法观察。

注：凝胶染色前先观察 FT™染料的荧光 ，以免与下一步的凝胶染料发生荧光淬灭。

(2)采用后染法，使用 DNA 凝胶染料对凝胶进行染色，观察总的 PCR 产物或阴性对照组的 PCR 扩增产物。

三、TUNEL 法检测细胞凋亡

详情见 Tunel 法细胞凋亡说明书。

6 注意事项

l荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

l本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

l为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。