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qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒 MF1815

FluorTrace

产品货号:MF1815 储存条件:4 ℃,避光,24个月

产品介绍

1 产品基本信息

产品名称(中文):qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒

产品名称(英文):qGreenPro™ dsDNA HS Assay Kits

产品编号:MF1815

2 规格或纯度

组分

MF1815100 assays

MF1815500 assays

A. qGreenPro™

250 µL

1.25 mL

B. qGreenPro™ 1×Buffer

50 mL

250 mL

C. qGreenPro™ dsDNA标准液 1

1 mL

5 mL

D.qGreenPro™ dsDNA标准液 2

1 mL

5 mL

3 产品介绍

产品简介:

qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒是荧光检测 dsDNA 并进行定量的一种产品,这种检测方法非常灵敏,常用于分子生物学中 cDNA 文库的构建和亚克隆 DNA 片段的纯化。常规的 DNA 含量检测方法是在 260 nm 处测其吸光值,这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分 DNA 和 RNA,而且灵敏度低 (5 μg/mL dsDNA 溶液 A260=0.1)。qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒检测方法简单方便,已成为生物制品残留 DNA 检测的标准。

qGreenPro™只有与 dsDNA 结合后才发出荧光,并且荧光强度与 DNA 浓度成正比。qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒检测浓度范围 10 pg/μL~100 ng/μL、检测质量范围 0.2~100 ng,且线性关系较好 (R²>0.99)。

产品特点:

l特异性好:特异性结合 dsDNA,对常规污染物具有耐受性

l灵敏度高、范围广:检测浓度范围10 pg/μL~100 ng/μL,检测质量范围0.2~100 ng 且线性关系较好 (R²>0.99)

适用范围:

ldsDNA 定量

lNGS 二代测序

l文库构建

4 储存与运输

储存条件:4℃避光保存,有效期见外包装长期保存可以储存在- 20℃

运输条件:冰袋运输。

5 使用方法(仅供参考)

(1) 准备足够量的 0.5 mL 的可用于 Qubit 仪器的 Ep 管。

注:Qubit 仪器适用 Ep 管为透明的薄壁 Ep 管,Ep 管的侧面不要做标记,以免影响荧光值采集

(2) 制定标准曲线:准备两个 Ep 管,每管加入 190 µL 配置好的 1× qGreenPro™ 工作液,再分别加入 10 µL 组分 C 和组分 D,涡旋震荡 2~3 s,震荡过程中不要产生气泡。

(3) 样本处理:干净的 Ep 管中加入一定体积的待测样本 (1~20 µL),然后加入相应体积的检测工作液使得每个检测样品的终体积为 200 µL,涡旋混匀。

注:样本检测浓度 / 样本质量接近检测上下限,会出现复孔重复性差,定量不准确的结果,建议通过预实验将样本调整至合适范围进行检测。

(4) 室温避光孵育 2 min

(5) 按照 Qubit 荧光仪的操作说明,选择 dsDNA 高敏检测程序测定浓度。

6 注意事项

l使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

l荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

l本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

l为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

l本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。

7 附录:耐干扰物质影响表

耐干扰物质名称

耐干扰程度

信号变化

琼脂糖

0.1%

4% ↑

醋酸钠

30 mM

3% ↑

NaCl

200 mM

30% ↓

苯酚

0.1%

13% ↑

MgCl₂

50 mM

33% ↓

尿素

2 M

9% ↑

醋酸氨

50 mM

3% ↓

乙醇

10%

12% ↑

聚乙二醇

2%

8% ↑

SDS

0.01%

1% ↓

曲拉通

0.1%

7% ↑

BSA

2%

16% ↓

IgG

0.1%

19% ↑

ZnCl₂

5 mM

8% ↓

氯仿

2%

14% ↑


技术问答

为什么测了3次复孔,复孔之间浓度差异都比较大(CV值超过了15%)?

    可能由以下原因导致,可按顺序排查:

    (1) 产品使用前未恢复到室温,温度波动影响检测结果,需确保使用前将产品平衡至室温;

    (2) 测定浓度时用手掌握住已孵育好的 EP 管,手部温度改变体系温度,应避免直接接触孵育后的 EP 管;

    (3) 样本本身杂质过多,超过染料的耐干扰上限,需对样本进行进一步纯化处理。

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