1 产品基本信息
产品名称(中文):Ready-to-use qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒
产品名称(英文):Ready-to-use qGreenPro™ dsDNA HS Assay Kits
产品货号:MF1824
2 规格或纯度
100 T,500 T
3 产品介绍
产品简介:
本产品提供预混好的检测液,相比qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒(MF1815),可节省检测液预混时间,使用更便捷。其通过荧光检测实现双链 DNA(dsDNA)定量,检测快速、灵敏且精确,适用于 NGS 大规模 DNA 样品(如 cDNA 文库)的定量,对盐类、游离核苷酸、去污剂、蛋白质等常见污染物有一定耐受性。产品包含即用型工作液(已预混荧光染料)和 dsDNA 标准品,检测时仅需将 1~20 μL 样品与工作液混合,即可用 Qubit 荧光仪读数,操作简便、数据可靠。检测浓度范围为 10 pg/μL~100 ng/μL,检测质量范围为 0.2~100 ng,且线性关系良好(R²>0.99)。
产品特点:
l特异性好:特异性结合 dsDNA,对常规污染物具有耐受性;
l高效便捷:预混即用型,无需额外配制检测液,省时省力;
l灵敏度高、线性范围广:检测浓度 10 pg/μL~100 ng/μL,检测质量 0.2~100 ng,线性关系良好(R²>0.99)。
适用范围:
ldsDNA 定量
lNGS 二代测序
l文库构建
产品组分:
组分 | 100T | 500T |
A. qGreenPro™ 1×dsDNA HS 预混液 | 50 mL | 250 mL |
B. qGreenPro™ dsDNA标准液 1 | 1 mL | 5 mL |
C. qGreenPro™ dsDNA标准液 2 | 1 mL | 5 mL |
4 储存与运输
储存条件:4℃避光保存,有效期见外包装;长期保存可以储存在- 20℃;
运输条件:冰袋运输。
5 使用方法(仅供参考)
(1) 准备足够量适配 Qubit 仪器的 0.5 mL 透明薄壁离心管。
(2) 制定标准曲线:
取两个离心管,每管加入 190 µL qGreenPro™ 1×dsDNA HS 预混液;分别向两个离心管中加入 10 µL qGreenPro™ dsDNA标准液 1(组分 B)和 10 µL qGreenPro™ dsDNA标准液 2(组分 C);涡旋振荡 2~3 s 混匀,振荡过程中避免产生气泡(确保终体积为 200 µL)。
(3) 制备样本检测:取干净离心管,加入 1~20 µL 待测样本;加入相应体积的 qGreenPro™ 1×dsDNA HS 预混液预混液,使检测样品终体积为 200 µL;涡旋 2~3 s 混匀。
(4) 孵育:将标准品管和样本管置于室温避光环境,孵育 2 min。
(5) 按照 Qubit 荧光仪操作说明,选择 “dsDNA High Sensitivity” 检测程序,测定浓度。
6 注意事项
l使用前需将产品瞬时离心至管底,避免试剂残留管壁影响用量准确性;
l荧光染料易淬灭,操作全程需注意避光,减缓荧光淬灭;
l本产品仅限于科研使用;
l操作时需穿实验服、戴一次性手套,避免试剂接触皮肤和黏膜,保障安全与健康。
7 附录:耐干扰物质说明
耐干扰物质名称 | 耐干扰程度 | 信号变化 |
琼脂糖 | 0.1% | 4% ↑ |
醋酸钠 | 30 mM | 3% ↑ |
NaCl | 200 mM | 30% ↓ |
苯酚 | 0.1% | 13% ↑ |
MgCl₂ | 50 mM | 33% ↓ |
尿素 | 2 M | 9% ↑ |
醋酸氨 | 50 mM | 3% ↓ |
乙醇 | 10% | 12% ↑ |
聚乙二醇 | 2% | 8% ↑ |
SDS | 0.01% | 1% ↓ |
曲拉通 | 0.1% | 7% ↑ |
BSA | 2% | 16% ↓ |
IgG | 0.1% | 19% ↑ |
ZnCl₂ | 5 mM | 8% ↓ |
氯仿 | 2% | 14% ↑ |
可能由以下原因导致,可按顺序排查:
(1) 产品使用前未恢复到室温,温度波动影响检测结果,需确保使用前将产品平衡至室温;
(2) 测定浓度时用手掌握住已孵育好的 EP 管,手部温度改变体系温度,应避免直接接触孵育后的 EP 管;
(3) 样本本身杂质过多,超过染料的耐干扰上限,需对样本进行进一步纯化处理。
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