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Ready-to-use qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒 MF1824

FluorTrace

产品货号:MF1824 储存条件:4 ℃,避光,18个月

产品介绍

1 产品基本信息

产品名称(中文):Ready-to-use qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒

产品名称(英文):Ready-to-use qGreenPro™ dsDNA HS Assay Kits

产品货号:MF1824

2 规格或纯度

100 T500 T

3 产品介绍

产品简介

本产品提供预混好的检测液,相比qGreenPro™ dsDNA HS 定量试剂盒(MF1815),可节省检测液预混时间,使用更便捷。其通过荧光检测实现双链 DNA(dsDNA)定量,检测快速、灵敏且精确,适用于 NGS 大规模 DNA 样品(如 cDNA 文库)的定量,对盐类、游离核苷酸、去污剂、蛋白质等常见污染物有一定耐受性。产品包含即用型工作液(已预混荧光染料)和 dsDNA 标准品,检测时仅需将 1~20 μL 样品与工作液混合,即可用 Qubit 荧光仪读数,操作简便、数据可靠。检测浓度范围为 10 pg/μL~100 ng/μL,检测质量范围为 0.2~100 ng,且线性关系良好(R²>0.99)。

产品特点

l特异性好:特异性结合 dsDNA,对常规污染物具有耐受性;

l高效便捷:预混即用型,无需额外配制检测液,省时省力;

l灵敏度高、线性范围广:检测浓度 10 pg/μL~100 ng/μL,检测质量 0.2~100 ng,线性关系良好(R²>0.99)。

适用范围

ldsDNA 定量

lNGS 二代测序

l文库构建

产品组分:

组分

100T

500T

A. qGreenPro™ 1×dsDNA HS 预混液

50 mL

250 mL

B. qGreenPro™ dsDNA标准液 1

1 mL

5 mL

C. qGreenPro™ dsDNA标准液 2

1 mL

5 mL

4 储存与运输

储存条件:4℃避光保存,有效期见外包装长期保存可以储存在- 20℃

运输条件:冰袋运输。

5 使用方法(仅供参考)

(1) 准备足够量适配 Qubit 仪器的 0.5 mL 透明薄壁离心管。

(2) 制定标准曲线:

取两个离心管,每管加入 190 µL  qGreenPro™ 1×dsDNA HS 预混液;分别向两个离心管中加入 10 µL qGreenPro™ dsDNA标准液 1(组分 B)和 10 µL qGreenPro™ dsDNA标准液 2(组分 C);涡旋振荡 2~3 s 混匀,振荡过程中避免产生气泡(确保终体积为 200 µL)。

(3) 制备样本检测:取干净离心管,加入 1~20 µL 待测样本;加入相应体积的 qGreenPro™ 1×dsDNA HS 预混液预混液,使检测样品终体积为 200 µL;涡旋 2~3 s 混匀。

(4) 孵育:将标准品管和样本管置于室温避光环境,孵育 2 min。

(5) 按照 Qubit 荧光仪操作说明,选择 “dsDNA High Sensitivity” 检测程序,测定浓度。

6 注意事项

l使用前需将产品瞬时离心至管底,避免试剂残留管壁影响用量准确性;

l荧光染料易淬灭,操作全程需注意避光,减缓荧光淬灭;

l本产品仅限于科研使用;

l操作时需穿实验服、戴一次性手套,避免试剂接触皮肤和黏膜,保障安全与健康。

7 附录:耐干扰物质说明

耐干扰物质名称

耐干扰程度

信号变化

琼脂糖

0.1%

4% ↑

醋酸钠

30 mM

3% ↑

NaCl

200 mM

30% ↓

苯酚

0.1%

13% ↑

MgCl₂

50 mM

33% ↓

尿素

2 M

9% ↑

醋酸氨

50 mM

3% ↓

乙醇

10%

12% ↑

聚乙二醇

2%

8% ↑

SDS

0.01%

1% ↓

曲拉通

0.1%

7% ↑

BSA

2%

16% ↓

IgG

0.1%

19% ↑

ZnCl₂

5 mM

8% ↓

氯仿

2%

14% ↑


技术问答

为什么测了3次复孔,复孔之间浓度差异都比较大(CV值超过了15%)?

    可能由以下原因导致,可按顺序排查:

    (1) 产品使用前未恢复到室温,温度波动影响检测结果,需确保使用前将产品平衡至室温;

    (2) 测定浓度时用手掌握住已孵育好的 EP 管,手部温度改变体系温度,应避免直接接触孵育后的 EP 管;

    (3) 样本本身杂质过多,超过染料的耐干扰上限,需对样本进行进一步纯化处理。

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