1 产品基本信息
产品名称(中文):DAB 显色试剂盒(浅棕色)
产品名称(英文):DAB Color Development Kit (Light Brown)
产品编号:MD1620
2 规格或纯度
500 T,3000 T
组分 | 组分含量 | |
MD1620S | MD1620L | |
A. DAB浓缩液(20×) | 1.25 mL×2 | 15 mL |
B. DAB稀释液 | 47.5 mL | 142.5 mL×2 |
C. 显色增强剂(10×) | 5 mL | 30 mL |
3 产品介绍
产品简介:
DAB,即 3,3’-diaminobenzidine 是辣根过氧化物酶(Peroxidase)的常用显色底物,在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化,形成浅棕色不溶性产物,该棕色沉淀不溶于水和乙醇,因此在 DAB 显色后,还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。对于过氧化物酶的活性的检测,灵敏度高、特异性好,是 HRP 结合物最常用的底物。
产品特点:
l稳定性强:产品性能稳定,染色效果好;
l批间差小:产品为公司自研,批间差控制的好;
l选择灵活:提供多种 DAB 显色试剂,选择灵活方便。
适用范围:
免疫组化、原位杂交、Western Blot
4 储存与运输
储存条件:-20 ℃ 避光保存
运输条件:冰袋运输
5 使用方法(仅供参考)
(1) 常规组织切片、细胞样品、膜与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液清洗 3~5 次。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用适当洗涤液清洗 3~5 次,每次 3~5 min。
(2) 临用前按照下表比例配制 DAB 显色工作液:可以根据需要按比例缩放体积。
DAB 显色工作液 | 增强型 DAB 浓缩液(20×) | 增强型 DAB 稀释液 |
1 mL | 0.05 mL | 0.95 mL |
10 mL | 5 mL | 9.5 mL |
注:(1)溶液 A/B 必须完全混匀后使用,现配现用效果最佳。
(2)不要使用含有叠氮化钠的缓冲液,叠氮化钠是一种 HRP 抑制剂。
(3)配制好的工作液可在 4℃避光稳定保存 5 天,工作液内出现的任何沉淀均不影响染色。对于出现沉淀的工作液,建议高速离心后取上 清使用。
(3) 最后一次洗涤完毕后,去除洗涤液,加入适量的 DAB 显色工作液,确保能充分覆盖样品。室温避光孵育 1~30 min 或更长时间,若无背景出现则可继续孵育至显色达到预期深浅。免疫印迹实验,应保证膜在足够多的染色液中且能被自由晃动。
(4) 去除 DAB 染色工作液,用蒸馏水冲洗样品几次以中止显色反应。
(5) 对于用显微镜观察的细胞或组织样品,可复染样品(可选)并安装在水性封固介质中。或者可以将样品脱水并安装在有机封固剂中。对于免疫印迹实验,可将膜用水冲洗,风干,然后在室温下储存。
6 注意事项
lDAB 对人体有害,操作时请小心,为了您的安全和健康,请注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
l工作液需即用即配,新鲜配制的工作液为黄棕色,放置几分钟变灰色,放置过久可能会产生沉淀。
l显色时间严格控制,根据情况调整,以免显色过度。
l请将沾有DAB显色液A 的容器等放在含有3% KMnO4,2% NaHCO3的溶液浸泡 3 h,以减少污染。
本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
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