1 产品基本信息
产品名称:Ready-to-use NucGreen (2 mM in DMSO)
产品编号:MX1401
2 规格或纯度
1 mL
3 产品介绍
产品简介
NucGreen 是一种具有膜渗透性的 DNA 染料,可优先与双链 DNA(dsDNA)结合并发出绿色荧光,尤其适用于活细菌染色,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均能实现有效染色。与 SYBR 系列染料相比,NucGreen 稳定性显著更优,可在室温下进行常规处理与储存,不易发生降解;经其染色的细菌,可通过荧光显微镜或流式细胞仪完成检测,满足科研中核酸染色相关实验需求。
产品特点
l适用性广:可适配大部分细菌的染色需求,无严格菌种限制,涵盖革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌。
l稳定性好:荧光亮度强,抗淬灭性能优异,产品本身化学性质稳定,便于储存与运输,降低实验操作难度。
l批间差小:为公司自主研发产品,生产流程严格管控,有效减少不同批次产品间的性能差异,保障实验重复性。
l膜透性佳:具备良好的细胞膜渗透性,可穿透活细菌细胞膜与胞内 dsDNA 结合,适合活细菌染色场景。
l使用方便:可与公司其他配套试剂搭配使用,灵活满足不同实验设计需求,简化实验方案构建流程。
适用范围
l核酸染色:核心用于活细菌的核酸染色,支持通过荧光显微镜、流式细胞仪等设备完成检测;
l细菌类型适配:可对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌进行染色,适配大部分常见科研用细菌菌株。
产品参数:
Ex/Em:503/530 nm (DNA Bound)
光谱图:
4 储存与运输
储存条件:2~8℃避光保存;
运输条件:冰袋运输。
5 使用方法(仅供参考)
本方法针对 “液体培养基中细菌染色” 设计,其他条件(如固体培养基、特殊菌株)的染色需实验者结合文献资料自行摸索最佳方案。
(1) 在目标细菌的最适培养基中,于 37℃条件下过夜培养,直至细菌生长至对数生长期。
(2) 取 1 mL 培养至对数生长期的菌液,以 5000~10000×g 转速离心 10~15 min,收集菌体;若菌体难以收集,可适当提高转速或延长离心时间。加入 1 mL 0.85% NaCl 溶液重悬菌体。
注:在 0.85% NaCl 或 pH=7.5 的 10 mM Tris 缓冲液中染色效果最佳,在 PBS 或培养基中染色易导致荧光信号较弱,影响检测灵敏度。
(3) 向重悬后的菌液中加入 NucGreen 染料,使染料终浓度达到 25 μM;若需同时区分活死细菌,可在此步骤加入死细菌染料 EthD-III(需参考 EthD-III 说明书调整终浓度)。
注:NucGreen 工作浓度需根据细菌类型调整,建议浓度范围为 5~50 μM,首次使用可通过梯度浓度预实验确定最佳浓度。
(4) 将加入染料的菌液置于室温或 37℃条件下,避光孵育 30 min。
(5) 以 5000~10000×g 转速离心 10~15 min,再次收集菌体;加入适量 0.85% NaCl 溶液重悬菌体。
(6) 上机检测:对于荧光显微镜,可选择 FITC 滤光片进行观察与成像;对于流式细胞仪,可选择 BL1/FL1 通道进行检测。
6 注意事项
l产品安全性:本产品仅限科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品、药品、化妆品等领域;通过常规安全检测,无明确致突变性报告,但仍需规范操作。
l操作规范:实验时需穿戴实验服及一次性手套,避免皮肤直接接触试剂;若试剂不慎接触皮肤或黏膜,需立即用大量清水冲洗。
l试剂使用:使用前需瞬时离心,确保试剂完全收集至管底;染料需避光保存与使用,避免强光直射导致荧光淬灭,影响染色效果。
l设备适配:荧光显微镜需搭配 FITC 滤光片,流式细胞仪需选择 BL1/FL1 通道,确保检测设备参数与染料荧光特性匹配。
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