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D-萤光素钠盐 MX1418

FluorTrace

货号:MX1418 储存条件:-20℃干燥避光保存

产品介绍

1 产品基本信息

产品名称(中文):D - 萤光素钠盐

产品名称(英文):D-Luciferin, Sodium Salt

产品编号:MX1418

2 规格或纯度

10 mg ,500 mg

3 产品介绍

产品简介

活体成像技术(Optical in Vivo Imaging)主要采用生物发光与荧光两种技术,生物发光法基于萤光素酶催化底物化学发光的原理:将体外稳定表达萤光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射的底物反应,通过光学系统检测光强度,间接反映细胞数量变化或细胞定位,该技术广泛应用于肿瘤 / 疾病动物模型建立、病毒学研究、siRNA 研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等领域。

D-Luciferin 是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于生物技术领域,尤其适用于体内活体成像技术。在 ATP 和萤光素酶作用下,萤光素被氧化,可在 560 nm 处检测到化学发光;Luciferin 由 Luc 基因编码,该基因作为报告基因存在于多种细胞中,因化学发光背景低,luc 基因在低表达水平下即可被监测,此外,萤光素 / 萤光素酶还可用于测量 10 −15 摩尔量的 ATP(检测原理见图 1)。

本产品推荐使用多功能酶标仪的化学模块进行检测。

image.png 

1 检测原理图

产品特点

l灵敏度高:能够检测最低10 −15 mol的萤光素酶

l线性范围广:酶的浓度线性范围可达 8 个数量级

适用范围

体外化学发光分析(in Vitro)、活体成像实验(in Vivo)、高灵敏度 ATP 分析

产品参数

l外观:可溶于水的浅黄色固体

lEx/Em:328/533 nm

lCAS 号:103404-75-7

l分子式:C11H7N2NaO3S2 

l分子量:302.3

l分子结构图:

image (1).png 

 

4 储存与运输

储存条件:-20℃干燥避光保存

运输条件:冰袋运输

5 使用方法(仅供参考)

l体外发光检测

(1)  330 μL 无菌水溶解 10 mg D-萤光素钠盐,配制成 100 mM 储存液;混匀后立即使用或分装后- 20℃冻存;

(2) 用预热好的细胞培养基稀释 D-萤光素钠盐储存液,配置成 0.5~1 mM 工作液;

注:不同细胞样本所需 D - 萤光素钠盐浓度可能不同,需进行预实验摸索最优条件;

(3) 去除培养细胞的培养基;

(4) 向细胞内添加适量萤光素工作液,在 37℃孵育 5~10 min,然后进行图像分析。

l活体成像分析

(1) 用无菌的 DPBS(无Mg2+ Ca2+)配制D -萤光素钠盐工作液(15 mg/mL),即向10 mg D -萤光素钠盐中加入 667 μL DPBS,用 0.2 μm 滤膜过滤除菌;

(2) 参照下表,根据不同注射方式注射对应体积的工作液;

(3) 注射入体内 5~10 min 后,进行成像分析

注:每种动物模型需进行萤光素的动力学研究,以确定信号峰值时间。

注射方式

注射剂量

静脉注射(25~27 gauge 针头)

10 μL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 萤光素工作液

腹腔注射(25~27 gauge 针头)

10 μL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 萤光素工作液

肌肉注射(27 gauge 针头)

50 μL 工作液,浓度为 1~2 mg/mL 萤光素

鼻内注射(pipette)

50 μL 工作液,浓度为 3 mg/mL 萤光素

6 注意事项

lD-Luciferin, Potassium Salt 样品的背景荧光主要来源于萤光素;

lD - 萤光素钾盐在水中的溶解度可达 100 mM,请使用不含 ATP 的无菌水作为溶剂,且需立即使用或分装后保存于 - 20℃;

l本产品可用于检测报告基因和 ATP 检测;

l若进行 ATP 分析,请选择不含 ATP 的无菌水和试剂;

l本产品适用于大部分细胞类型样本和动物模型;

l本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内;

l为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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