1 产品基本信息
产品名称(中文):D - 萤光素钠盐
产品名称(英文):D-Luciferin, Sodium Salt
产品编号:MX1418
2 规格或纯度
10 mg ,500 mg
3 产品介绍
产品简介
活体成像技术(Optical in Vivo Imaging)主要采用生物发光与荧光两种技术,生物发光法基于萤光素酶催化底物化学发光的原理:将体外稳定表达萤光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射的底物反应,通过光学系统检测光强度,间接反映细胞数量变化或细胞定位,该技术广泛应用于肿瘤 / 疾病动物模型建立、病毒学研究、siRNA 研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等领域。
D-Luciferin 是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于生物技术领域,尤其适用于体内活体成像技术。在 ATP 和萤光素酶作用下,萤光素被氧化,可在 560 nm 处检测到化学发光;Luciferin 由 Luc 基因编码,该基因作为报告基因存在于多种细胞中,因化学发光背景低,luc 基因在低表达水平下即可被监测,此外,萤光素 / 萤光素酶还可用于测量 10 −15 摩尔量的 ATP(检测原理见图 1)。
本产品推荐使用多功能酶标仪的化学模块进行检测。
图 1 检测原理图
产品特点
l灵敏度高:能够检测最低10 −15 mol的萤光素酶
l线性范围广:酶的浓度线性范围可达 8 个数量级
适用范围
体外化学发光分析(in Vitro)、活体成像实验(in Vivo)、高灵敏度 ATP 分析
产品参数
l外观:可溶于水的浅黄色固体
lEx/Em:328/533 nm
lCAS 号:103404-75-7
l分子式:C11H7N2NaO3S2
l分子量:302.3
l分子结构图:
4 储存与运输
储存条件:-20℃干燥避光保存
运输条件:冰袋运输
5 使用方法(仅供参考)
l体外发光检测
(1) 用 330 μL 无菌水溶解 10 mg D-萤光素钠盐,配制成 100 mM 储存液;混匀后立即使用或分装后- 20℃冻存;
(2) 用预热好的细胞培养基稀释 D-萤光素钠盐储存液,配置成 0.5~1 mM 工作液;
注:不同细胞样本所需 D - 萤光素钠盐浓度可能不同,需进行预实验摸索最优条件;
(3) 去除培养细胞的培养基;
(4) 向细胞内添加适量萤光素工作液,在 37℃孵育 5~10 min,然后进行图像分析。
l活体成像分析
(1) 用无菌的 DPBS(无Mg2+ 和Ca2+)配制D -萤光素钠盐工作液(15 mg/mL),即向10 mg D -萤光素钠盐中加入 667 μL DPBS,用 0.2 μm 滤膜过滤除菌;
(2) 参照下表,根据不同注射方式注射对应体积的工作液;
(3) 注射入体内 5~10 min 后,进行成像分析
注:每种动物模型需进行萤光素的动力学研究,以确定信号峰值时间。
注射方式 | 注射剂量 |
静脉注射(25~27 gauge 针头) | 按 10 μL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 萤光素工作液 |
腹腔注射(25~27 gauge 针头) | 按 10 μL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 萤光素工作液 |
肌肉注射(27 gauge 针头) | 50 μL 工作液,浓度为 1~2 mg/mL 萤光素 |
鼻内注射(pipette) | 50 μL 工作液,浓度为 3 mg/mL 萤光素 |
6 注意事项
lD-Luciferin, Potassium Salt 样品的背景荧光主要来源于萤光素;
lD - 萤光素钾盐在水中的溶解度可达 100 mM,请使用不含 ATP 的无菌水作为溶剂,且需立即使用或分装后保存于 - 20℃;
l本产品可用于检测报告基因和 ATP 检测;
l若进行 ATP 分析,请选择不含 ATP 的无菌水和试剂;
l本产品适用于大部分细胞类型样本和动物模型;
l本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内;
l为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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