1 产品基本信息
产品名称(中文):增强型 D-萤光素钾盐
产品名称(英文):Enhanced D-Luciferin, Potassium Salt
产品编号:MX1421
2 规格或纯度
10 mg,500 mg
3 产品介绍
产品简介:
活体成像技术(optical in vivo imaging)目前主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术,生物发光法基于萤光素酶能催化底物化学发光的原理:将体外能稳定表达萤光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射入体内的底物发生反应,利用光学系统检测光强度,间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。该技术已被广泛应用于多个领域,最常用的有肿瘤或疾病动物模型的建立,并可用于病毒学研究、siRNA 研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。
D-Luciferin 是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。在 ATP 和萤光素酶的作用下,萤光素能够被氧化,且可在 560 nm 处检测到其化学发光。Luciferin 由 luc 基因编码,该基因作为报告基因在多种细胞中存在;由于化学发光的低背景性,luc 基因在很低的表达水平下就可以被监测到。此外,萤光素 / 萤光素酶被用来测量10-15摩尔量的 ATP。相比于基础版 D -萤光素钾盐(MX1420),D -萤光素钾盐(增强型)在相同浓度下,底物与萤光素酶反应后发光更强且更持久。
适用范围:
l活细胞、组织或生物体内 luc 标记基因和萤光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析;
l报告基因分析、免疫分析和 ATP 萤光卫生监测分析。
产品参数:
l外观:可溶于水的浅黄色固体
lEx/Em:328/533 nm
4 储存与运输
储存条件:-20℃干燥避光保存
运输条件:冰袋运输
5 使用方法(仅供参考)
l体外发光检测
(1) 用 314 µL 蒸馏水溶解 10 mg D -萤光素钾盐,配制成 100 mM 的储存液(200×),混匀后立即使用或分装后- 20℃冻存;
(2) 用细胞培养基按 1:200稀释储存液,配置工作液(终浓度 150 μg/mL),即 1×D -萤光素钾盐;
(3) 去除培养细胞的培养基;
(4) 向细胞内添加适量 1×萤光素工作液,然后进行图像分析(或细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。
l活体成像分析
(1) 用无菌的 1×PBS 配制 D -萤光素钾盐工作液(15 mg/mL),即向 10 mg D -萤光素钾盐中加入 667 µL 1×PBS,用 0.2 µm 滤膜过滤除菌;使用时需保持冰冷且避光;
(2) 参照下表,根据不同的注射方式,注射对应体积的工作液;
注射方式 | 注射剂量 |
静脉注射(25-27 gauge 针头) | 按 10 μL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 萤光素工作液 |
腹腔注射(25-27 gauge 针头) | 按 10 μL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 萤光素工作液 |
肌肉注射(27 gauge 针头) | 50 μL,浓度为 1–2 mg/mL 萤光素工作液 |
鼻内注射(pipette) | 50 μL,浓度为 3 mg/mL 萤光素工作液 |
(3) 注射入体内 5-10 min 后,进行成像分析。
6 注意事项
lD-Luciferin, Potassium Salt 样品的背景荧光主要来源于萤光素,如果不立即使用本产品,建议分装后,-20℃避光保存;
l本产品仅限于科研,不得用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途;
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