1 产品基本信息

产品名称（中文）：D -萤光素钾盐

产品名称（英文）：D-Luciferin, Potassium Salt

产品编号：MX1420

2 规格或纯度

10 mg，500 mg

3 产品介绍

产品简介：

活体成像技术（Optical in Vivo Imaging）主要采用生物发光（Bioluminescence）与荧光（Fluorescence）两种技术，生物发光法基于萤光素酶催化底物化学发光的原理：将体外稳定表达萤光素酶的细胞株植入动物体内，与后期注射的底物反应，通过光学系统检测光强度，间接反映细胞数量变化或细胞定位，该技术广泛应用于肿瘤 / 疾病动物模型建立、病毒学研究、siRNA 研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等领域。

D-Luciferin 是萤光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于生物技术领域，尤其适用于体内活体成像技术。在 ATP 和萤光素酶作用下，萤光素被氧化，可在 560 nm 处检测到化学发光；Luciferin 由 Luc 基因编码，该基因作为报告基因存在于多种细胞中，因化学发光背景低，luc 基因在低表达水平下即可被监测，此外，萤光素 / 萤光素酶还可用于测量10 ^-15摩尔量的 ATP（检测原理见图 1）。

本产品推荐使用多功能酶标仪的化学模块进行检测。

图 1 检测原理图

产品特点：

灵敏度高：能够检测最低10 ^-15mol的萤光素酶

线性范围广：酶的浓度线性范围可达 8个数量级

适用范围：

活细胞组织或生物体内 Luc 标记基因和萤光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析、报告基因分析、免疫分析、ATP 萤光卫生监测分析。

4 储存与运输

储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期见外包装

运输条件：冰袋运输

5 使用方法（仅供参考）

l体外发光检测

(1) 用 330 μL 无菌水溶解 10 mg D -萤光素钾盐，配制成 100 mM 储存液；混匀后立即使用或分装后 - 20℃冻存；

(2) 用预热好的细胞培养基稀释 D -萤光素钾盐储存液，配置成 0.5~1 mM 工作液

注：不同细胞样本所需 D -萤光素钾盐浓度可能不同，需进行预实验摸索最优条件；

(3) 去除培养细胞的培养基；

(4) 向细胞内添加适量萤光素工作液，在 37℃孵育 5~10 min，然后进行图像分析。

l活体成像分析

(1) 用无菌的 DPBS（无Mg 2+ 和Ca 2+ ）配制 D - 萤光素钾盐工作液（15 mg/mL），即向 10 mg D -萤光素钾盐中加入 667 μL DPBS，用 0.2 μm 滤膜过滤除菌；

(2) 参照下表，根据不同注射方式注射对应体积的工作液；

(3) 注射入体内 5~10 min 后，进行成像分析

注：每种动物模型需进行萤光素的动力学研究，以确定信号峰值时间。

6 注意事项

lD-Luciferin, Potassium Salt 样品的背景荧光主要来源于萤光素；

lD - 萤光素钾盐在水中的溶解度可达 100 mM，请使用不含 ATP 的无菌水作为溶剂，且需立即使用或分装后保存于 - 20℃；

l本产品可用于检测报告基因和 ATP 检测；

l若进行 ATP 分析，请选择不含 ATP 的无菌水和试剂；

l本产品适用于大部分细胞类型样本和动物模型；

l本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内；

l为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。